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COLORACIONES La molécula de un colorante tiene dos componentes importantes:
cromógeno: uno que aporta el color,
auxocromo: permite la unión a elementos del tejido
*Cuando el colorante unido al tejido tiene el mismo color que en solución se denomina ortocromasia
*Cuando un colorante se une al tejido y aporta un color diferente al que tiene en solución se dice que ha
ocurrido un fenómeno de metacromasia
COLORACIONES TOPOGRÁFICAS: son fundamentalmente morfológicas, ya que permiten distinguir detalles
estructurales de células y tejidos.
2. COLORACIONES SELECTIVAS O ESTRUCTURALES: se utilizan destacar de manera diferencial algunos
componentes celulares o tisulares estructurales, se pueden emplear técnicas especiales.
3. COLORACIONES CITO-HISTOQUÍMICAS: tienen como finalidad la identificación y localización de
determinados componentes químicos en los tejidos, ya sea dentro de las células o en los espacios
extracelulares.
C
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COLORACIONES TOPOGRAFICAS Permiten distinguir detalles morfológicos de células y tejidos.
Los mecanismos más comunes de esta coloración se basanen la ionización de moléculas como proteínas,
polisacáridos y
ácidos nucleicos
-----
GRUPOS ÁCIDOS (capaces de ceder H+) ----- GRUPOS BÁSICOS(capaces de
captar H+)
**carboxilo (COOH) hidroxilo (OH) sulfúrico (SO4 =) **amino (NH2)
Esto permite que dichas moléculas se combinen con colorantes básicos o
ácidos
COLORANTE ÁCIDO (O ANIÓNICO) es aquel que cuenta con una carga negativa en la porción coloreada de
la molécula, y por lo tanto es capaz de formar una unión salina con un grupo tisular de carga positiva.
COLORANTE BÁSICO (O CATIÓNICO) es el que forma uniones salinas con grupos tisulares cargados
negativamente.
LAS PROTEINAS SON ANFÓTERAS - su ionización depende del pH -
Las proteínas en medio ácido tienen carga positiva y reaccionan con colorantes ácidos, mientras
que en medio alcalino tienen carga negativa y reaccionan con colorantes básicos.
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CORTE DE GLÁNDULA SALIVAL PARÓTIDA COLOREADO CON H/E
COLORACIONES SELECTIVAS O ESTRUCTURALES
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COLORACIONES CITO-HISTOQUÍMICAS: Permiten reconocer la presencia de determinados compuestos
químicos en células y tejidos. El fundamento de la unión del colorante con los componentes tisulares es una
reacción química característica
Acido Peryódico de Schiff para colorear de manera diferencial los polisacáridos Permiten reconocer la
presencia de determinados compuestos químicos en células y tejidos. El fundamento de la unión del
colorante con los componentes tisulares es una reacción química característica.
Azul Alciano para identificar la presencia de mucopolisacáridos=glucosaminosglicanos (GAGS)
Azul de Toluidina en metacromasia permite reconocer GAG, ortocromasia se comporta como un colorante
básico que tiñe sustancias ácidas
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DESGASTE: La técnica de desgaste en el procedimiento histológico para la observación de tejidos duros
dentarios, en la misma se realiza el desgaste secuencial y progresivo de un diente. Estos se logran
desgastando la pieza de tejido calcificado mediante discos abrasivos, hasta obtener cortes de unos 50 µm.
La técnica de descalcificación elimina minerales de calcio para obtener secciones del tejido u órgano de
interés. Los tejidos altamente mineralizados como el hueso y diente requieren descalcificación como un paso
inicial, con la finalidad de integrarlo en parafina, seccionar, teñir los tejidos y posterior análisis
histopatológico. La descalcificación se realiza normalmente después de la fijación Hay dos grupos principales
de agentes descalcificantes: los ácidos y los quelantes de calcio.
¿CÓMO SE ESTUDIAN LAS CÉLULAS?
• MICROSCOPIA, óptica o electrónica
• CULTIVO, de células y tejidos
• FRACCIONAMIENTO CELULAR, centrifugación diferencial y análisis morfológico y molecular
• IDENTIFICACIÓN, CUANTIFICACIÓN y ANÁLISIS de MOLÉCULAS en células y tejidos
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Cultivo de células y tejidos: Microscopio óptico invertido
*Separar las células del tejido u órgano (digestión enzimática)
*Aislamiento de cada tipo celular (clasificador celular)
• Recipientes de vidrio o plástico
• Medios de cultivo
• Condiciones estériles
• Observación por contraste de fases (microscopios invertidos)
Tipos de cultivos
• Primarios
• Secundarios
• Líneas celulares establecidas
• Clones celulares
APLICACIONES DEL CULTIVO CELULAR:
Los cultivos celulares se utilizan tanto en la investigación básica como en la aplicada. En la investigación
básica, permiten estudiar procesos complejos entre ellos:
• La actividad intracelular: transcripción de DNA, síntesis de proteínas, metabolismo energético, ciclo celular,
diferenciación, apoptosis.
• El flujo intracelular de biomoléculas: procesamiento del ARN, el movimiento del ARN desde el núcleo hacia
el citoplasma, el movimiento de las proteínas hacia diversos orgánulos, el ensamblaje y desensamblaje de los
microtúbulos.
• Genómica y proteómica: análisis genético, infección, transformación celular, inmortalización, senescencia,
expresión génica, rutas metabólicas.
• Las interacciones celulares: morfogénesis, proliferación celular, adhesión celular, interacciones con la
matriz, invasión celular.
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DENTIFICACIÓN, CUANTIFICACIÓN y ANÁLISIS DE MOLÉCULAS EN CÉLULAS Y TEJIDOS
*Resonancia magnética nuclear
*Microelectrodos
*Fluorescencia
*Citoquímica
*Inmunomarcación
Son proteínas del tipo de las
Inmunoglobulinas
*ADN recombinante
*Radiomarcación
INMUNOMARCACION: Permiten la identificación de moléculas
específicas en diferentes clases de células y/o tejidos mediante
el uso de ANTICUERPOS permite la localización subcelular in situ
y la correlación con parámetros morfológicos de la estructura
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Imagen confocal de células en cultivo
HeLa. Mitocondria
están teñidas de rojo, núcleo azul con
DAPI microtúbulos teñidos de verde.
Las mitocondrias forman redes densas y
dinámicas en el soma de las células y se
colocalizan con la red de tubulina
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TEORICO 6 IMPRIMIBLE COLORACIONES La molecula de un colorante tiene dos componentes importantes.pdf
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